摘要:本研究鑒定了魚類重要致病菌殺魚愛德華氏菌(Edwardsiella piscicida)抗強(qiáng)酸系統(tǒng)GadBCD及其功能。通過序列分析和共轉(zhuǎn)錄實(shí)驗(yàn)表明:GadBCD系統(tǒng)由1個(gè)谷氨酸脫羧酶、1個(gè)谷氨酰胺酶和3個(gè)轉(zhuǎn)運(yùn)體組成,它們組成1個(gè)操縱子。qRT-PCR發(fā)現(xiàn)強(qiáng)酸和高溫刺激細(xì)菌時(shí)gadBCD表達(dá)基本不變,但過氧化氫和宿主血清刺激時(shí)gadBCD表達(dá)顯著上調(diào)。利用同源重組構(gòu)建了GadBCD系統(tǒng)缺失突變株Δgad P,通過比較野生株和Δgad P的生長曲線以及酸性壓力下存活率等實(shí)驗(yàn),發(fā)現(xiàn)GadBCD系統(tǒng)不僅是殺魚愛德華氏菌抗中強(qiáng)酸的重要參與者,也是抗強(qiáng)酸所必需的;通過比較野生株和Δgad P在生物膜形成、運(yùn)動性、抗宿主血清殺傷、感染細(xì)胞等方面的差異,發(fā)現(xiàn)GadBCD參與了細(xì)菌的毒力。綜上所述,GadBCD系統(tǒng)是殺魚愛德華氏菌重要的抗強(qiáng)酸系統(tǒng),并參與了細(xì)菌的致病作用。