摘要:溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)是海水養(yǎng)殖過程中一種常見的致病菌。當(dāng)溫度為25~35℃時(shí),容易暴發(fā)流行性的弧菌病。利用OverlapPCR和同源基因重組技術(shù),成功構(gòu)建溶藻弧菌RseB基因敲除缺失株。結(jié)果顯示:與野生溶藻弧菌相比,在生長(zhǎng)速度上,RseB基因顯示出與生長(zhǎng)具有相關(guān)性,RseB基因缺失提高了溶藻弧菌的生長(zhǎng)速度;RseB基因缺失造成溶藻弧菌溶血性下降37.5%。凡納濱對(duì)蝦(Litopenaeus vannamei)致病性試驗(yàn)結(jié)果顯示,RseB基因缺失菌株感染后凡納濱對(duì)蝦開始死亡時(shí)間推遲4 h, LT50推遲20 h。攻毒后的第24小時(shí),RseB基因缺失菌株在對(duì)蝦中的定殖能力下降53.4%。受溶藻弧菌感染的凡納濱對(duì)蝦肝胰腺嚴(yán)重受到侵染,肝小管的排列順序紊亂,并且間隙變大、邊界線也逐漸模糊,肝胰腺小管的管腔消失;肝細(xì)胞的排列開始不規(guī)則,有些肝細(xì)胞形狀很明顯地腫大,甚至整個(gè)細(xì)胞開始變性,被伊紅染深,細(xì)胞核開始消失。相同時(shí)間點(diǎn)的病理切片顯示,RseB基因敲除菌株感染的凡納濱對(duì)蝦肝胰腺受損情況相對(duì)較輕。