摘要：2020年5月，廣東廣州某野生動(dòng)物保護(hù)基地爆發(fā)疑似病毒引發(fā)的疾病?，F(xiàn)場(chǎng)采樣發(fā)現(xiàn)，病鯢體長(zhǎng)約2 m,反應(yīng)遲鈍，體表有出血點(diǎn)或潰瘍癥狀。本研究采用胖頭鯉肌肉細(xì)胞系(fat head minnow epithelial cells, FHM)培養(yǎng)、超薄切片透射電鏡觀察、病毒主要衣殼蛋白(major capsid protein, MCP)克隆與測(cè)序分析等方法，從患病大鯢中分離得到一株病毒，鑒定其屬于虹彩病毒科蛙病毒屬，命名為大鯢虹彩病毒廣州分離株(CGSIV-GZ)。FHM經(jīng)患病大鯢組織勻漿液接種后出現(xiàn)細(xì)胞圓縮、死亡、脫落等典型的細(xì)胞病變癥狀。將感染后的FHM細(xì)胞制作超薄切片，通過(guò)電鏡觀察發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)HM細(xì)胞中存在大量直徑約100～120 nm具囊膜的正六邊形成熟病毒粒子，形態(tài)與虹彩病毒相似。根據(jù)虹彩病毒MCP基因保守區(qū)域序列設(shè)計(jì)特異性引物對(duì)病鯢組織樣本進(jìn)行PCR擴(kuò)增，獲得了431 bp的目的基因片段，測(cè)序后經(jīng)采用BLAST軟件分析，發(fā)現(xiàn)其與GenBank中的蛙病毒衣殼蛋白基因同源性達(dá)96%～99%。確認(rèn)本次野生動(dòng)物保護(hù)基地大鯢發(fā)生大規(guī)模死亡是蛙病毒感染所致。
